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Q:40744ES Hoechst33342/PI双染试剂盒原理及结果判断?

Hoechst33342/PI主要是区分凋亡细胞和坏死细胞的,细胞发生凋亡时,染色质会固缩。Hoechst33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(…

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Q:40747ES一个细胞两种颜色均被染上,怎么判断结果呢?

可判定为死细胞。原因:由于死细胞缺乏酯酶或酯酶活性很低,Calcein AM进入细胞后含有酯酶的活细胞可以产生Calcein,而死细胞不能或很少能产生Calcein,因此仅活细胞会被染色为强绿色荧光,死细胞不能被染色或者染色非常弱。PI由于不能穿透活细胞的细胞膜,而只能染色细胞膜完整性被破坏的死细胞…

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Q:使用碱性磷酸酶染色试剂盒(40749ES60),细胞,本身就是高表达碱性磷酸酶,做了处理之后可能就稍微低表达一些,拍出来的图,是细胞一整个轮廓是染色的?

颜色深浅可以反应碱性磷酸酶的多少,但是微量差别可能肉眼无法观察,可以进行颜色灰度值测定(此方法可能会存在结果不稳定问题),可参考 WB 条带的计算方法。

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Q:40749ES这个可以用于判断细胞活性不?

不能用于细胞活性检测,本试剂盒主要用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞 iPS 的鉴定,也可以用于 Western 等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。 检测细胞活性老师可以用cck-8 等试剂盒。

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Q:40749ES使用 24 孔板做成骨细胞分化后的碱性磷酸酶染色,请问可以使用本产品吗?

可以用于24孔板的成骨细胞分化后碱性磷酸酶染色。细胞固定推荐4% PFA室温固定10-15 min(避免甲醇固定,会抑制AP酶活),染色液需现配现用,37°C避光孵育15-30 min后观察。建议同步设置阴性对照(未经诱导的细胞),以区分内源性与诱导后表达的ALP。

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Q:40754ES着色很浅或未染上色,可能是什么原因?

1.样本无衰老情况:如果染色的样本没有诱导成功或衰老程度不明显,从而导致染色的时候着色较浅或者未染上色。 2.试剂未完全溶解:β-半乳糖苷酶染色液解冻后若有沉淀,必须完全溶解无沉淀之后才可以使用。 3.冰冻切片放置过久:冰冻切片时间较长,β-半乳糖苷酶可能降解了。 4.染色时可能把样本放在细胞培养箱…

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