都可以的。腹腔注射扩散较慢,持续发光长;静脉注射,扩散快,但发光持续时间很短。
腹腔注射(i.p.),按照150 mg/kg的D-荧光素/体重浓度进行注射,20g的C57小鼠为例,每只小鼠检测一次的用量:150 mg/kg×20g=3mg,100mg÷3mg=33只。仅供参考,具体的用量以试剂为准,未加损耗情况。
一般情况下,D-荧光素钾盐不会对动物产生毒副作用,不产生免疫反应,可多次重复给药做长时程活体成像。
该转染试剂是脂质纳米颗粒。
不是,是类似LNP的组分。
如果是96孔板转染的话,试一下1ul试剂(40809)直接和2ul(0.1ug/uL)mRNA复合,10min左右,加opti 6ul。其他孔板需要按照倍数扩增。
可以不调。
不建议冻存,储存液4℃保存3个月。
若转染前进行了换液,可不进行换液,若需要换液可在转染后6-8h可以进行换液。
制备复合物的时候需要使用无血清培养基,加入细胞中的时候不要求无血清培养。
可能是DNA的纯度不是很纯,有杂质,某种物质引起的PEI析出浑浊,如果把DNA的量降下来会减少这种现象。不建议转染的时候加入过多的质粒和转染试剂,转染试剂效率较高不需要额外提高。
客户提供的数据可参考,10ml大概需要400ul的氢氧化钠溶液。建议慢慢调,根据自己的配置情况而定,建议用10ul的枪头调PH,如果PH值过大,溶液浑浊了再调回6.8,可能会影响转染效率。
不可以用于单链RNA的转染,会出现转染不成功的结果。
粉末避光保存于-20 或-70℃,有效期至少 1 年。
推荐仪器:1、具有生物化学发光检测模块。荧光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器:如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统,德国 Bruker 公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。2、多功能酶标仪:需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块…
化学发光,无需激发波长。萤火虫荧光素发射波长是 560nm。海肾荧光素发射波长是 465 nm。
可以通过血脑屏障,胎盘屏障和血液测试屏障,也可以进入活细胞。
兼容血清,不兼容双抗。
有些细胞如 293T、293FT、Hela 等转染效率基本在85%以上;所有阳离子脂质体转染试剂对细胞都会存在一定的毒性,但是我们公司的转染试剂经过配方优化后其毒性大大降低,且转染效率也有进一步提升。
对于换液可以区分两种情况;1、转染之前如果没有换液应在转染 6 小时左右后换液,以保证细胞生长所需营养,2、如果转染之前如果有换液,可以按照平时等到培养基出现营养不足时换液。