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蛋白免疫产品技术咨询FAQ中心

Q:20563ES客户做的是蛋白质组学,蛋白溶液里会含有DNA,RNA,会干扰蛋白吸附吗?含核酸样品的偶联中 如何消除核酸样品的干扰?

不能这样操作的,DNA,RNA会有干扰。一般我们只用于纯品的偶联;如果是在NHS磁珠上先固定这蛋白对应的抗体,然后通过抗体结合蛋白, 可以去除多余的核酸。

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Q:20547ES为什么蛋白纯度不够?

(1)在不改变buffer条件下,在洗脱的步骤改为线性梯度洗脱,如果已经是线性洗脱,那么延缓梯度增加的速度,如原来10个CV拉到100%,现在改为20个CV拉到100%,梯度拉的越缓慢分辨率越高,但是相应的样品稀释度也会增加;(2)优化buffer条件,包括PH及盐的浓度和种类;(3)使用更高分辨率…

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Q:20550ES为什么蛋白纯度不够?

(1)在不改变buffer条件下,在洗脱的步骤改为线性梯度洗脱,如果已经是线性洗脱,那么延缓梯度增加的速度,如原来10个CV拉到100%,现在改为20个CV拉到100%,梯度拉的越缓慢分辨率越高,但是相应的样品稀释度也会增加;(2)优化buffer条件,包括PH及盐的浓度和种类;(3)使用更高分辨率…

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Q:20553ES为什么蛋白纯度不够?

(1)在不改变buffer条件下,在洗脱的步骤改为线性梯度洗脱,如果已经是线性洗脱,那么延缓梯度增加的速度,如原来10个CV拉到100%,现在改为20个CV拉到100%,梯度拉的越缓慢分辨率越高,但是相应的样品稀释度也会增加;(2)优化buffer条件,包括PH及盐的浓度和种类;(3)使用更高分辨率…

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Q:20561ES目标蛋白回收率低怎么办?

1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;​2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole浓度;3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;4)增加磁珠用量;5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

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Q:20561ES如何提高目标蛋白纯度?

1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole和NaCl浓度;2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质;4)延长清洗的时间,增加清洗次数;5)采用梯度Imidazole浓度洗脱目标蛋白。

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Q:20562ES目标蛋白回收率低怎么办?

1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;4)增加磁珠用量;5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

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