凝胶面积增大或厚度增加时,相应增加染色液用量和染色时间。
蛋白分析FAQ
可以。如不慎使凝胶干裂,可加入 50 mL 去离子水,高火加热 1 min,低火加热3-5 min,可一定程度恢复干裂的PAGE 胶,但染色效果有一定毁坏。
使用前,正钒酸钠需要先被充分活化(去聚合)以获得最大的磷酸酶抑制活性,步骤如下:1)正钒酸钠溶于水配制 200 mM 的溶液,称取适量正钒酸钠粉末溶于纯水中。2)用 1N NaOH 或 1N HCl 调整 pH 至 10.0。正钒酸钠起始溶液的 pH 值依批次变化而有差异。pH 10.0 溶液呈现黄…
常见使用浓度范围为 1-10 mM。
在加入EDTA 或经稀释后,正钒酸钠的抑制表现可逆性,可以减弱 / 解除抑制,酶活能够恢复。
该蛋白酶抑制剂溶解在DMSO中;该试剂盒中的B组分溶解在ddH2O中。
有效成分是1% Triton X-100;提取的蛋白有活性。
不适用,产品仅适用于大肠杆菌菌种。
该产品适用于重组蛋白或酵母蛋白的活性提取,可用于Westem Blot、免疫沉淀、蛋白活性检测等。
不同的样品提取量不同,100mg毕赤酵母提取得到的蛋白大概为1~3mg。
可以用预冷的PBS轻轻重悬洗涤核沉淀一次,再次离心弃去上清,可明显降低核组分中残留的胞浆蛋白。
在不被蛋白酶水解和细菌污染的条件下,提取的蛋白可于-80℃保存一年。
目前我们的试剂盒只针对哺乳动物细胞和组织的提取,试剂盒中因不含去除细胞壁的成分,所有不能用于植物蛋白或细菌蛋白的提取。
试剂 A 是线粒体抽提液,目的是提取线粒体;试剂 B 是线粒体裂解液,目的是提取线粒体蛋白;试剂 C 是PMSF,目的是抑制蛋白降解。
本试剂盒可用于快速便捷分离组织/细胞线粒体,获得的线粒体纯度较高,且绝大部分都含有完整的内膜和外膜。
可以。除此之外,还可用于后续 SDS-PAGE、Western 及双向电泳等分析。
E-64 是一种不可逆的,强效,高选择性半胱氨酸蛋白酶抑制剂和钙蛋白酶激活抑制剂,可以透过细胞和组织,且具有低毒性,因此被广泛地用于在体内研究中。但是E-64 不能抑制丝氨酸蛋白酶(除胰蛋白以外)。
E-64 作为蛋白酶抑制剂使用时,建议工作浓度 1-10 μM。
可以。推荐用无菌水或超纯水溶解。
一般分装于-20℃保存,避免反复冻融。