E-64d,一种合成的 E-64 类似物,E-64c 乙酯,是一种膜渗透型不可逆硫醇蛋白酶抑制剂,可抑制钙蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和组织蛋白酶F,K,B,H,L 等。
蛋白分析FAQ
不可以。该产品溶于DMSO,乙醇:>10 mg/mL;不溶于水。所以不能用纯水配制工作液,否则无法溶解。
一般分装于-20℃保存,避免反复冻融。
试剂 A 中含有 sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin 等多种抑制剂,有效抑制蛋白酶活性,最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性;而且可以实现植物细胞、组织或原生质体样品总蛋白的提取。
可以的。除此之外,分离得到的蛋白组份可应用于 SDS-PAGE、Western Blot、免疫沉淀等。
植物在裂解后,产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA 等的复合物。在不检测和基因组DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白, 则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如…
可以的。可采用我公司BCA蛋白浓度测定试剂盒(20201ES)对提取样品中的蛋白质进行定量。
不推荐。该产品溶于DMSO(2 mM),1N NaOH(50mM),微溶于水,因此不推荐直接用水溶液配置。
一般分装于-20℃保存,避免反复冻融。
建议现配现用,存放不可超过一天。
正钒酸钠是一种常用的竞争性磷酸酶抑制剂,可以抑制碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP) , 酸性磷酸酶(acid phosphatase) , 酪氨酸磷酸酶(tyrosine phosphatase, TP)等,也可以抑制Na+/K+ATPase 等ATPase。
尽量避免反复冻融,建议分装后使用。
本品属于裂解强度居中的RIPA 裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用,胞浆强裂解,胞膜、胞核较强裂解。
不会的。本品含有 sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin 等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
影响不大,可以使用,但长时间不用时请存放于-20℃。
本品可用于细胞/组织裂解液,WB/IP 裂解液,是一种非变性条件下的裂解液。
裂解得到的蛋白样品,可以用 Yeasen BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(Cat#20201ES76)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用 Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。使用其他品牌的BCA 建议参照产品说明书中对去污剂等的耐受范围。
不能。本品是动物组织和细胞专用的,植物细胞和细菌都有细胞壁,不能裂解;理论上可以加溶壁酶后再裂解,但没有尝试过。
4 度或冰上裂解,时间没有要求,具体实验具体分析,一般细胞是充分裂解后应没有明显的细胞沉淀,织的话用用匀浆器匀浆,直至充分裂解呈匀浆状态。
该产品不含EDTA成分。