有效裂解成分为1% NP-40。
蛋白分析FAQ
该产品为片剂,是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含 AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、PepstatinA 多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。
单一蛋白酶抑制剂的作用始终是受限制的,多数情况下未必能完全保证目的蛋白活性不受影响,尤其在需要检测同一样品内的多个蛋白时。“Cocktail”-蛋白酶/磷酸酶混合物此时就是最佳的选择。
该产品可同时持续抑制丝氨酸蛋白酶,半胱氨酸蛋白酶及金属蛋白酶等在内的多种蛋白酶;可应用几乎所有的组织及细胞提取物,包括动物,植物,酵母,细菌和真菌样品;1 片可应用于 10ml 裂解液;EDTA-Free 确保金属依赖性蛋白的有效纯化以及蛋白活性不受影响。
不可以用纯水或PBS溶解配制。该产品为片剂形式,设计用途是直接投入裂解液中使用,按1片/10 mL裂解液的比例即可,无需预先配制母液。如果确实需要溶液形式的100×母液,可选用20124ES。
广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。
本品不含 EDTA,特别适用于活性中心为金属离子依赖的蛋白;兼容后续的固定化金属离子亲和层析凝胶电泳及天然凝胶电泳等蛋白分析实验。
20124 成分与 20123 相同,以溶于DMSO 的溶液形式提供。二者均不含EDTA,EDTA 为金属蛋白酶抑制剂。区别在于 20123 为片剂,20124 为储液。
将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B,并加入PMSF至最终浓度为1 mM,混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60 mg组织加入200 µL组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液(对于不超过60mg的组织样品,仅需加入100微升组织匀浆液),并在玻璃匀浆器内充分匀浆。接…
仅适合于新鲜组织,不可用于冻存过的组织样本。
本产品不适用于真菌及植物样品的。
不建议冻存后再提取,需要新鲜样本,不适合冻存。可提取蛋白后再冻存到-80℃。
无色或几乎无色透明粘稠液体。能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶于石油醚。
气相色谱固定液(最高使用温度 190℃,溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇)分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性含氮化合物、硫醇。
在生物化学实验中,Triton-X114 常用于水相蛋白和脂蛋白的分离,如膜蛋白的提取等。
Triton-114 是常用完整的膜蛋白相分离试剂,利用其浊点特性:升温后,去污剂相与水相分离。疏水的膜蛋白因结合去污剂而随其进入去污剂相,亲水蛋白则留在水相,从而实现分离。该试剂能使亲水性的蛋白质从两亲性的蛋白质中溶解出来,能够对膜外周蛋白和膜整合蛋白进行亚组分分离,更具有灵活性。
具有刺激性,可能造成皮肤、眼睛刺激或呼吸道刺激。操作时务必穿戴实验服、手套和护目镜,在通风橱中进行。
正常的,本品为 100× 高浓度储存液,低温可能会有一些盐类物质析出,可以尝试温育待沉淀完全溶解后再取用,一般不影响使用效果。
可以的,用cocktail替代PMSF,在许多情况下是更优的选择,特别是当你的实验目的是全面保护蛋白样品时。
正常的,冻结不影响有效成分活性。使用前将分装管取出,温育至完全融解可正常取用;避免反复冻融。