与实际样品有关,填料色素沉淀,塌柱,流速慢等问题且用氢氧化钠清洗后无法改善就不能再使用了。一般能重复使用5-10次。
脱盐和置换缓冲液。
脱盐对柱效的要求不是很高。高:直径=5:1。
G25如果用于脱盐目的蛋白要大于5KD。
可以,柱高至少大于50cm。但此填料耐压性能不好,如果要纯化不同分子量蛋白可选择我们的蛋白精细纯化系列Geldex琼脂糖的填料。
一般是90%以上。
可以,不推荐5ml预装柱连接超过3个,多个串联会影响脱盐效果的。
不能,SDS一般是和蛋白质结合在一起的。可以去除蛋白溶液里的EDTA和游离的金属离子。
与实际样品有关,填料色素沉淀,塌柱,流速慢等问题且用氢氧化钠清洗后无法改善就不能再使用了。一般能重复使用5-10次。
不是,若需无菌,可在使用后用 0.22 μm 低蛋白吸附滤膜过滤除菌。
一般是90%以上。
不是的,但是X-press Tag 多肽用于洗脱 X-press Tag 融合蛋白白比较理想。
可以使用非变性洗脱方式。
介质的载量本身就不高,洗脱浓度有可能较低,有可能因浓度较低而看不到明显条带。建议下一步增加洗脱强度。
通常结合抗体纯化柱使用,或者前期已将带有 HA 标签的抗体纯化出来,反应条件如下:加入 150ug/ml,洗脱HA 融合蛋白,4℃缓慢孵育 30min,500rpm 离心 30S, 收集上清.
加入 5 倍柱体积的酸性洗脱液,收集管中预先加好中和液 50 µl 中和液/ml 洗脱液,分管收集。 注意:酸性洗脱后填料要立即用平衡液平衡,Anti-HA Affinity gel 在洗脱液中不要超过 20 分钟。酸性洗脱液:0.1M glycine HCl,pH2.0-2.8,中和液: 1M T…
可以。该产品可用于Myc标签蛋白免疫沉淀(IP)。
可以。该产品适用于V5标签蛋白免疫沉淀(IP)。
禁止在不含甘油的溶液中冻存。
建议在 4°离心,因为蛋白在室温下容易降解。