可以尝试降低上样流速，延长结合时间来提高目的蛋白和填料的结合效果。
蛋白纯化FAQ
EDTA的作用是保护MBP标签蛋白免受蛋白酶降解，减少核酸污染带来的问题。如果没这些问题，可以不加。
平衡中NaCl是为了抑制非特异性吸附。
洗脱液中的麦芽糖cas号是6363-53-7，推荐货号719576。
可能是平衡/洗杂不充分；建议增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂。
可能是目的蛋白未表达；建议优化实验方案，确保目的蛋白表达。
由于非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降。具体实验次数需要根据柱效和实验结果。
由于非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降。具体实验次数需要根据柱效和实验结果。
可能是融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲影响了目的蛋白的结合力；建议更换载体。
可能是平衡/洗杂不充分；建议加一些蛋白酶抑制剂，如PMSF、EDTA 等。
可能是样品pH 值不在内毒素结合范围内；建议用 0.1MNaOH 或 0.1M HCl 调节至 pH7-8。
树脂纯化过其他样品；不用使用过的树脂去除不同样品内毒素。
可能是样品非特异性吸附在树脂上；建议增加样品和平衡液的NaCl 浓度。
20%DMSO，20%乙醇，20%甘油；1M 尿素，300mM 咪唑；0.05% Tween 20， 10mM DTT 等
可根据填料的内毒素载量，可检测自己样品中的内毒素含量确定；如果实在无条件检测自己样品中的内毒素的含量，初次实验可按照填料：样品体积比=1：1或1：2上样
酸碱交替清洗去除偶联不牢的组分以减少后续纯化时配体脱落。
看您的抗原稳定性吧，您抗原是蛋白还是多肽,一般可以用接近10次左右。用几次之后不结合抗体了说明不能用了。
2）抗原上的巯基位点有没有数量限制？1）TCEP这个测试过已经是完全过量可以还原蛋白。如需调整TECP用量可以做几个浓度梯度对比还原后巯基的数量。2）没有限制。
1.5mg左右
结合生物素化BSA载量约4mg/ml介质。