蛋白纯化FAQ

1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间；​2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole浓度；3)添加合适的蛋白酶抑制剂，防止目标蛋白降解；4)增加磁珠用量；5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数；6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole和NaCl浓度；2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂，防止目标蛋白降解；3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质；4)延长清洗的时间，增加清洗次数；5)采用梯度Imidazole浓度洗脱目标蛋白。

有，见下图

1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间；2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度；3)添加合适的蛋白酶抑制剂，防止目标蛋白降解；4)增加磁珠用量；5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数；6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度；2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂，防止目标蛋白降解；3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质；4)延长清洗的时间，增加清洗次数。

两者都是表面为NHS基团修饰的磁珠，能够与氨基的蛋白和其他分子形成稳定的肽键，用于亲和纯化或者分析检测抗体、抗原和其他生物分子。聚合物的磁珠一般粒径较小，为1-2μm，主要用于分析检测领域（如体外诊断、微生物检测、免疫沉淀、免疫共沉淀等）；而NHS琼脂糖磁珠是以天然的亲水性高分子琼脂糖为基材的多孔微…

偶联配体后可以反复使用。但不能更换配体。

未使用的产品保护液是异丙醇，可以在-20℃中保存不结冰，偶联蛋白后为考虑蛋白稳定性且反复冻融影响填料性能，选择2-8℃保存。

1mg/ml的浓度也是可以偶联的。0.2mg/ml浓度有点低，看下是否能超滤浓缩，低浓度样品的偶联效率无法作保证。推荐用于偶联的抗体浓度＞1mg/ml。

也可以用0.1M 甘氨酸，ph3.0作为清洗液。一般选择这个条件是模拟抗体纯化洗脱液的条件，先进行几次清洗 将结合力弱的蛋白去除，避免后续使用过程中的配体脱落。

这个理论上是可行的，关于这方面的应用我们暂时没有数据积累。这个与说明书中蛋白偶联步骤基本一致。样品需在不含伯氨基的离子缓冲液中，磁珠按照说明书中清洗步骤先用稀盐酸清洗然后用偶联液清洗，清洗结束后立即与样品混合接触，28℃偶联4h左右。样品浓度要求以及单位体积磁珠偶联的量，暂无数据。

本透析袋截留分子量 25kDa。

本透析袋截留分子量 50kDa。

浸没在 20%乙醇中。4℃可存放一周左右。

再生纤维素。

本透析袋截留分子量 14kDa。

本透析袋截留分子量 14kDa。

再生纤维素。

本透析夹为长度为 4cm，可适用于 21mm,27mm 透析袋。

不需要，室温即可。