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Q:20561ES目标蛋白回收率低怎么办?

1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;​2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole浓度;3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;4)增加磁珠用量;5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

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Q:20561ES如何提高目标蛋白纯度?

1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole和NaCl浓度;2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质;4)延长清洗的时间,增加清洗次数;5)采用梯度Imidazole浓度洗脱目标蛋白。

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Q:20562ES目标蛋白回收率低怎么办?

1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;4)增加磁珠用量;5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

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Q:20563ES这种NHS聚合物的磁珠和NHS琼脂糖的磁珠的区别?

两者都是表面为NHS基团修饰的磁珠,能够与氨基的蛋白和其他分子形成稳定的肽键,用于亲和纯化或者分析检测抗体、抗原和其他生物分子。聚合物的磁珠一般粒径较小,为1-2μm,主要用于分析检测领域(如体外诊断、微生物检测、免疫沉淀、免疫共沉淀等);而NHS琼脂糖磁珠是以天然的亲水性高分子琼脂糖为基材的多孔微…

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Q:20563ES在文库的接头上偶连氨基后,是否能和NHS磁珠进行共价结合呢?有偶联方法吗?

这个理论上是可行的,关于这方面的应用我们暂时没有数据积累。这个与说明书中蛋白偶联步骤基本一致。样品需在不含伯氨基的离子缓冲液中,磁珠按照说明书中清洗步骤先用稀盐酸清洗然后用偶联液清洗,清洗结束后立即与样品混合接触,28℃偶联4h左右。样品浓度要求以及单位体积磁珠偶联的量,暂无数据。

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