蛋白纯化FAQ

在含有以下物质，Benzonase 的活性会降低 50%或以上：>150mM 一价阳离子，>100mM 磷酸盐，>100mM 硫酸铵，>100mM 盐酸胍，>0.1%SDS，>1%Triton X-100，>1%Tween 20。

常用生物缓冲液，如TBS、MOPS（pH6-8）等。

采用 EDTA 螯合金属离子（浓度大于6 mM)会可逆地抑制 Benzonase 核酸酶活性，极端条件会造成不可逆失活，例如：100mM-NaOH，70℃处理 30min 等。Benzonase 核酸酶可采用阴离子交换柱或气相色谱法从目的产物中分离出去，由于这种核酸内切酶及其稳定，建议在终产物要求排…

我们目前没有客户这样做过，如果为了处理细胞结团，加进去反应后通过换液就可以把全能核酸酶给去掉；工业上病毒纯化中过柱可以把全能核酸酶去掉。您这个加了后进行核酸提取，不能保证全能核酸酶完全去除干净，一旦有残留，提取的核酸都会被切割降解。70℃30min可以灭活，不确定对您血液样本是否有影响，按说明书的条…

体积=产品规格(25ku/50ku/100ku)➗酶活(250-300U/ul)，具体酶活可以根据批次号钉钉查询coa。

保存于-20℃。储存 Buffer：20mM Tris-HCl pH8.0，50 mM NaCl，2mM MgCl2， 50% glycerin。

建议反应体系pH 值为 6~8

反应中Mg2+的终浓度为 5~10mM。

细胞破碎后由于含有大量 DNA 和 RNA，黏度很高，过柱不容易。解决的方法有两种：（1）用核酸酶。（2）也可以用高压匀浆。都可以达到降低黏度的作用。差别在于：用核酸酶，DNA 和RNA 可以绛解成小片段或单核苷酸；高压匀浆用机械剪切力将 DNA和 RNA 处理成较大的片断。超声波处理在处理小量表达…

细胞培养使用步骤可以参考说明书，有详细说明，全能核酸酶影响酶效的因素有很多，一下数据可以参考。

我们对于酶活进行了区间测定，为了更准确的使客户有精确使用量，默克的是一个大于250u。

我们的纯度测定是采用高相液相的方式（HPLC），默克的采用是SDS测定，纯度都大于99%。行业一般认为HPLC的方式会比SDS的方式更为准确些。