本产品可以作用于PCR产物，但需保证PCR产物长度>500 bp。因转座酶无法作用于DNA末端，PCR产物最末端50 bp的测序覆盖度可能会有所降低。为避免末端测序覆盖度降低，推荐在制备PCR产物时将待测区域两末端各延长50-100 bp
产品12201 适用于 500 pg至500 ng的片段化DNA 样本。
本公司建库试剂盒通常不包含接头，接头产品单独设置货号。客户可根据实验平台（如Illumina、MGI等）及样本数量等需求，选择适配的接头产品。
12199ES 与 12201ES 建库试剂盒的核心区别在于扩增模块的设计。具体选择建议如下：（1）若需高产量扩增，推荐使用 12199ES 建库试剂盒，其扩增模块适配高效扩增需求，可提升样本中目标核酸的产量；（2）如后续实验对扩增保真度要求较高（例如进行单核苷酸多态性（SNP）检测等精准分析），则…
磁珠用量参考如下表（具体用量需根据实际建库体系体积及样本类型调整）：（1）12199（Canace 血液基因组 DNA 建库试剂盒）：建议磁珠用量为体系体积的 1.8 倍（例如 100 μL 体系需 180 μL 磁珠）；（2）12200（Canace 唾液基因组 DNA 建库试剂盒）：建议磁珠用量…
末端修复/加 A 步骤需开启热盖的原因如下：（1）末端修复反应体系中，部分酶促反应（如 Taq 酶介导的延伸反应）在 72℃ 高温下进行，若热盖关闭，反应过程中产生的冷凝液会回流至反应管内，导致反应体系体积损失或局部浓度变化，影响酶活性及反应效率；（2）接头连接反应通常在较低温度（如 16℃ 左右）…
针对FFPE样本建库，建议如下：（1）对于低质量FFPE样本，可使用石蜡样本修复试剂（Cat#12606）以优化文库质量。该试剂能在末端修复步骤中同步完成样本修复，无需额外实验操作，有助于提升文库产量。（2）操作时需注意严格按照产品说明书进行样本预处理及建库流程，确保实验条件（如温度、时间等）符合要…
1）末端修复/加 A：需使用 T4 DNA 聚合酶和耐高温 Taq 酶；2）T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）；3）接头连接：需使用 T4 DNA 连接酶；4）扩增模块：12201ES 对应的扩增模块为 12621/12624 高保真 DNA 聚合酶；12199ES 对应的扩增模块为 12620E…
接头连接后**不可以直接进行分选**。原因是连接反应体系中含有的Ligation Enhancer（连接增强剂）内含高浓度PEG（聚乙二醇），PEG会对后续的分选过程造成显著干扰。因此，接头连接后若需进行片段分选，必须先通过纯化步骤（如使用磁珠法、柱纯化或乙醇沉淀等方法）去除Ligation Enh…
FFPE样本修复试剂可针对石蜡样本的切口、缺刻及末端氧化情况进行有效修复。对文库构建的影响主要体现在：（1）可提升文库产量；（2）对测序质量（如Coverage等指标）无明显影响。需注意，该修复试剂的修复过程存在额外引入突变的可能性，因此肿瘤等样本的客户不建议使用。
文库片段大小分布通常受二代测序技术的读长限制、测序需求、仪器型号及测序模式（单端或双端测序）等因素影响，一般在 200-800 bp 范围内。