Literature新品上市:翌圣Ox-LDL,从液体到冻干,6个月稳定护航动脉粥样硬化研究
动脉粥样硬化是由血管内皮损伤、局部脂质代谢紊乱和进行性炎症引起的,因其有引起缺血性心脏病、中风等严重心血管疾病的危险而受到广泛关注。由于病变早期没有明显症状,往往难以及时发现和治疗。到目前为止,尽管越来越多的证据表明治疗纳米平台在早期动脉粥样硬化的诊断和预防方面具有独特的优势,但仍然没有一个可行的解决方案来解决药物功能单一、缺乏靶点富集和诊断准确性差的挑战。
到目前为止,尽管越来越多的证据表明治疗纳米平台在早期动脉粥样硬化的诊断和预防方面具有独特的优势,但仍然没有一个可行的解决方案来解决药物功能单一、缺乏靶点富集和诊断准确性差的挑战。
因此,构建能够准确诊断和有效治疗早期易损动脉粥样硬化斑块的新型纳米平台对于降低心血管疾病的风险具有重要意义。
为了解决这个难题,2023年2月,四川大学生物医学工程学院王云兵教授团队在材料科学领域顶尖期刊《Advanced Materials》上发表了一篇题为《Duplex Responsive Nanoplatform with Cascade Targeting for Atherosclerosis Photoacoustic Diagnosis and Multichannel Combination Therapy》的研究论文,研究人员制备了一类新型π共轭聚合物(PMeTPP-MBT),用作光声造影剂。并进一步地设计了一种基于虾青素和SS-31肽的新型治疗复合物(PA/ASePSD),用于早期动脉粥样硬化的精确光声诊断和智能响应药物释放。

图1:具备级联靶向功能并负载光声造影剂的双响应纳米平台用于动脉粥样硬化光声诊断和多通道联合治疗示意图
备注:葡聚糖对受损内皮细胞上过表达的VCAM-1和CD-44的特异性高亲和力被用来赋予PA/ASePSD纳米颗粒对动脉粥样硬化病变的积极靶向性。使用ROS敏感的二硒修饰的虾青素构建疏水核心,并将SS-31肽通过pH敏感的席夫碱桥接到亲水段末端。ROS在斑块酸性微环境中过表达,靶向动脉粥样硬化病变后,引发PA/ASePSD纳米颗粒级联反应,释放虾青素和SS-31肽,从而实现上调ATP结合盒转运蛋白A1/G1(ABCA1/G1),抑制CD36和凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 (LOX-1)等清道夫受体,靶向恢复线粒体功能和抗炎的多通道联合治疗。另一方面,体内光声诊断图像也显示PA/ASePSD具有准确的斑块识别功能。
动脉粥样硬化(AS)研究领域,氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)被公认为诱导泡沫细胞形成和斑块发展的经典刺激因子。在王云兵教授团队的以上研究中,再次验证了这一科学共识“泡沫细胞通过LPS(500 ng/mL)和Ox-LDL(50 μg/mL)刺激RAW 264.7细胞48小时获得 ”,这一方法已成为国际通用的标准化泡沫细胞模型构建方案。翌圣的人源氧化低密度脂蛋白(Human Ox-LDL,Cat# 20605ES,无菌液体包装,直接稀释使用即可)被王云兵教授团队用于泡沫细胞研究的“金标准”诱导剂。
翌圣最新推出人源氧化低密度脂蛋白(冻干粉)(Human Ox-LDL,Powder,Cat# 20925ES),2~8℃无菌避光保存,有效期高达6个月,老师再也不必担心实验临时有变,浪费已采购的脂蛋白了(液体版20605ES有效期6周)。
使用说明
以Ox-LDL诱导RAW264.7细胞为例
1️⃣ 取20925ES05(2 mg装),用1 mL无菌水溶解冻干粉得到浓度为2.0 mg/mL溶液后,根据实验需要用PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养液稀释即可。使用时一定要无菌操作!浓度为2.0 mg/mL溶液,可置于 2~8℃无菌避光保存,有效期6周。
2️⃣ 20605ES05(2 mg装)为无菌液体包装,可以直接稀释使用。
取对数生长期的RAW264.7细胞,用PBS洗涤1次,0.25%胰蛋白酶-EDTA消化2~3 min,加入含血清培养基终止消化。1000 rpm离心5 min收集细胞,用培养基重悬并计数,调整细胞密度为1×108 cells/mL。
吸弃各孔旧培养基,分别加入含200 ug/mL Ox-LDL的新鲜培养基,空白对照组加入等量无菌PBS。继续置于CO2培养箱中孵育,诱导时间48 h。
12孔板诱导48 h后,吸弃培养基,用PBS洗涤2次,加入4%多聚甲醛固定30 min。弃固定液,PBS洗涤后,加入油红O染色液,室温避光染色30 min。
用60%异丙醇洗涤2次,去除多余染液,再用PBS洗涤1次,加入少量PBS浸没细胞。
倒置显微镜下观察并拍照,泡沫细胞因吞噬脂质呈红色颗粒状,用Image J软件统计红色阳性细胞率。
20925ES 20605ES 
备注:使用翌圣冻干粉Ox-LDL(20925ES)、液体Ox-LDL(20605ES)诱导RAW264.7细胞的泡沫化,阳性率分别为10.75%、10.92%,均可达到较好的诱导效果。
翌圣生物可为科研人员提供人源LDL、人源氧化LDL(Ox-LDL)、人源乙酰化LDL以及带荧光标记的LDL脂蛋白,均为无菌包装,直接稀释使用即可。后续也将持续推出保质期高达6个月的冻干粉脂蛋白。同时提供小鼠LDL与氧化LDL(Ox-LDL),同源匹配、活性稳定,小鼠血管/巨噬细胞实验直接“鼠”于您,告别跨物种误差。
表1:翌圣人源LDL产品选购指南
产品货号 | 英文名称 | 中文名称 | 规格 | 来源 | 应用建议 |
20605ES/ 20925ES | Human Ox-LDL/ Human Ox-LDL,Powder | 人源氧化低密度脂蛋白/ 人源氧化低密度脂蛋白(冻干粉) | 2 mg/ 5×2 mg/ 2 mg | 由过度铜离子介导人血浆来源的LDL进行的氧化修饰 | 广泛用于脂质代谢的研究,诱导巨噬细胞产生泡沫样细胞 |
20613ES | Human LDL | 人源低密度脂蛋白 | 2 mg | 来自健康人源血浆,超速离心纯化获得 | 可用于研究受体介导的内吞作用过程 |
20614ES | Human DiI-LDL | 红色荧光标记人源低密度脂蛋白 | 500 μg | 荧光探针Dil标记LDL | 用来观察培养细胞的LDL结合位点,或筛选LDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平或检测组织内的受体水平 |
20608ES | Human High Ox-LDL | 人源高氧化程度低密度脂蛋白 | 2 mg | 由过度铜离子介导人血浆来源的LDL 进行的高度氧化修饰 | 可产生明显的氧化应激,能够用来诱导细胞凋亡,并建立细胞损伤模型 |
20609ES | Human DiI-Ox-LDL | 人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白 | 500 μg | 荧光探针Dil标记Ox-LDL | 标记血管内皮细胞和巨噬细胞,可直接荧光显微镜观察鉴定或流式分选这些细胞,以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用 |
20604ES | Human Ac-LDL | 人源乙酰化低密度脂蛋白 | 2 mg/ 5×2 mg | 来自健康人源血浆LDL,进行乙酰化修饰 | 修饰型LDL更容易与内皮细胞和小胶质神经细胞的“scavenger”受体结合 |
20606ES | Human DiI-Ac-LDL | 红色荧光标记人源乙酰化低密度脂蛋白 | 500 μg | 荧光探针Dil标记Ac-LDL | 标记血管内皮细胞、巨噬细胞和内皮祖细胞(EPC),可直接荧光显微镜观察鉴定或流式分选这些细胞,以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用 |
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Human Ox-LDL人源氧化低密度脂蛋白 | 2 mg/ 5×2 mg | |
2 mg | ||
Human Ac-LDL人源乙酰化低密度脂蛋白 | 2 mg/ 5×2 mg | |
Human DiI-Ac-LDL DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白(红色荧光) | 500 μg | |
Human High Ox-LDL人源高氧化程度低密度脂蛋白 | 2 mg | |
Human DiI-Ox-LDL人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白 | 500 μg | |
Human LDL人源低密度脂蛋白 | 2 mg | |
Human DiI-LDL红色荧光标记人源低密度脂蛋白 | 500 μg | |
Mouse Low Density Lipoprotein(Mouse LDL) 小鼠低密度脂蛋白 | 2 mg | |
Mouse Oxidized Low Density Lipoprotein(Mouse Ox-LDL)小鼠氧化低密度脂蛋白 | 2 mg |
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Human VLDL人极低密度脂蛋白 | 2 mg | |
Human HDL人源高密度脂蛋白 | 2 mg | |
LPS,from Escherichia coli O55:B5 脂多糖来源于大肠杆菌O55:B5 | 5mg/ 10mg | |
Modified Oil Red O Staining Kit 改良油红O染色试剂盒 | 50T/ 100T |
Not listed yet IMG Human Oxidized Low Density Lipoprotein (...
Not listed yet IMG Human Acetylated Low Density Lipoprotei...
Not listed yet IMG Human High Oxidized Low Density Lipoprot...
Not listed yet IMG Human Low Density Lipoprotein (Human LDL...
Not listed yet IMG Human DiI-Low Density Lipoprotein (Human...
Not listed yet IMG Human Very Low Density Lipoprotein (Huma...
Not listed yet IMG Mouse Oxidized Low Density Lipoprotein(M...
Not listed yet IMG Mouse Low Density Lipoprotein(Mouse LDL)...
Not listed yet IMG Human Oxidized Low Density Lipoprotein(H...
Not listed yet IMG Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprote...
Not listed yet IMG Human High Density Lipoprotein (Human HD...
Not listed yet