Applications核酸提取瓶颈不再：直扩PCR技术，高效锁定目标基因

在科研工作中，大家或许都有过类似经历：面对一批实验小鼠，必须依次对其实施解剖，精细分离各种组织器官，继而提取DNA并经过纯化程序，再进行PCR扩增，直至完成电泳检测分析。如此复杂的流程常常耗时超过一天，而这一切努力的目标仅仅是确认小鼠DNA中是否包含特定目标基因。其中，DNA提取和纯化步骤堪称冗长繁杂。现在有一个问题值得探究：是否有捷径可以绕过这些步骤，直接检验目标基因呢？这里，小翌为您推荐一项创新的PCR技术——直扩PCR，它能有效地帮助您应对这一挑战，简化实验过程。

适用样本：水稻、大豆、玉米、拟南芥等植物的叶片、种子

产品优势：裂解时间仅需0-10 min

图3. 使用Plant Tissue PCR Kit (With Dye)扩增不同类型植物叶片结果。M：100 bp DNA ladder。C：相应植物纯化基因组DNA为模板。1-2：叶片组织裂解产物为模板。循环数：30个循环。

适用样本：含EDTA、肝素、柠檬酸盐等常规抗凝剂的新鲜血液、冷藏（冻）血液及Whatman903^®和FTA^®商用干血渍

产品优势：扩增速度快，仅需3-10 sec/kb

图4. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人全血中扩增不同长度DNA片段。血样为-20℃储存的EDTA抗凝血，血液模板浓度为10%，延伸时间设置10 sec/kb。M为10510ES60（Yeasen）。

• 耐受性强

图5 A. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人EDTA抗凝全血中扩增2 kb长度、GC含量71%的DNA片段。血液模板浓度设置梯度0.5-50%，延伸时间为10 sec/kb。B. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从小鼠EDTA抗凝全血中扩增2.2 kb长度、GC含量67%的DNA片段。血液模板浓度设置0.5-50%，延伸时间为10 sec/kb。M为10510ES60（Yeasen）。

适用样本：小鼠组织（如鼠尾、鼠耳、鼠趾等）

产品优势：对样本投入量要求低，仅需5 mg小鼠组织或1-5 mm鼠尾

• 广泛的模板兼容性

图6. 使用Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus直接裂解（70℃裂解10 min）扩增人293细胞、唾液、头皮组织，均有明显的目的条带，Marker: 10510ES60 (Yeasen).

1. 质粒 10189 1 kb 11. 质粒 10189 2 kb

2. T品牌 鼠耳 1 kb 12. T品牌鼠尾 2 kb

3. T品牌鼠尾 1 kb 13. T品牌鼠耳 2 kb

4. T品牌鼠趾 1 kb 14. T品牌鼠趾 2 kb

5-6. 10189 鼠耳 1 kb 15-16. 10189 鼠耳 2 kb

7-8. 10189 鼠尾 1 kb 17-18. 10189 鼠尾 2 kb

9-10. 10189 鼠趾 1 kb 19-20. 10189 鼠趾 2 kb

图7. 使用Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus和T品牌产品裂解不同组织扩增不同大小的目的片段，10189ES延伸速率为5 sec/kb，T品牌延伸速率60 sec/kb。（70℃裂解10 min）

结论：Mouse Tissue Direct PCR Kit Plus对不同组织裂解产物进行不同大小的目的片段扩增，在快速扩增的同时，均可达到产品定位的扩增效果，尤其是2 kb的扩增效果优于竞品。