选购指南WB实验指南：蛋白定量、蛋白染色选购指南

货号

20201ES

20200ES

20202ES

名称

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

BCA蛋白浓度测定试剂盒(即用型)

Bradford蛋白浓度测定试剂盒

吸收波长

562 nm

595 nm

原理

基于双缩脲反应，即在碱性环境下蛋白质将Cu²⁺还原成Cu⁺，产生一种紫蓝色复合物，

在562 nm处有高的吸光值，该反应产物的量与蛋白质浓度成正比。

Bradford染液（考马斯亮蓝G-250染料）与蛋白结合，

使染料的最大吸收峰从A456变为A595，

且测定的吸光值与蛋白浓度成正比

检测灵敏度

最小检测蛋白量可达0.2 μg，检测浓度下 限达到10 μg/mL

1~5 μg

时间

中速10-20 min

快速5-15 min

优点

兼容去污剂和变性剂，变异低

在20201ES的基础上提供即用型标准品，

省去繁琐的稀释步骤。

兼容还原剂，快速

缺点

低或不兼容还原剂，需手动稀释标准品

低或不兼容还原剂

低兼容去污剂

货号

20310ES

20203ES

20308ES

20309ES

36244ES

名称

考马斯亮蓝R250

考马斯亮蓝G250

考马斯亮蓝快速染色液(无需加热)

考马斯亮蓝快速染色液(8分钟)

蛋白质银染试剂盒

原理

通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力，考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。

蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子（如磺酸基），从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。

银离子在碱性pH 环境下被还原成金属银，沉淀在蛋白质的表面上显色。

应用

电泳蛋白染色

蛋白质含量测定

变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色

变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色及蛋白质谱分析

检测聚丙烯酰胺凝胶和

琼脂糖凝胶中的微量蛋白质

优点

染色灵敏度比氨基黑高5倍，

可达0.1 µg蛋白。

条带快速显色，

且背景颜色很浅不需要做褪色处理。操作快速、方便。

不含甲醇或乙酸等刺激成分，

灵敏度高，无需加热。

不含甲醇或乙酸等刺激成分，

8-10分钟即可完成PAGE胶上蛋白染色，无需脱色。

检测灵敏度更高，

可检测到10-100 ng蛋白质，

比考马斯亮蓝染色法灵敏100多倍

缺点

R250染色后需要脱色（有机试剂），才能进行蛋白条带的观察。

灵敏度低，检测下限为0.5 µg。

染色时间约30 min-1 h，

需要脱色（蒸馏水20-40 min）

染色过程中必须加热

操作较繁琐