可以先跑胶鉴定下样品、流穿和洗脱;若是目的蛋白结合比较弱,可以降低裂解液中的咪唑浓度,调PH到8。
含 20%乙醇的 1×PBS。
>40 mg 6×His-tagged protein/mL 基质。
不能。建议纯化所用缓冲液和蛋白溶液经 0.22 µm 或 0.45 µm 滤膜过滤后上柱使用。
这个没有统一标准,具体浓度需要自己在实验中探索。
可以先跑胶鉴定下样品、流穿和洗脱;若是本身样品中表达量太低,建议优化表达条件,使用包涵体纯化缓冲体系。
是的,是从牛血中提取的。
纤维蛋白原冻干粉组分表(100mg)纤维蛋白原:66mg甘露醇:12mg三羟甲基氨基甲烷:6mg氯化钠:16mg
我们的纤维蛋白原含有纤溶酶原,不过建议测定尿激酶活性时再加入适量的纤溶酶原。
会有明显的不溶物,可以离心(3000rpm,室温,10分钟)取上清液。浓度越高不溶物越多,建议离心取上清使用。不建议用过滤方法去除不溶物,纤维蛋白原溶液不好过滤。溶解时,可将纤维蛋白原粉末加入生理盐水中,在37℃左右,间断搅拌溶解30min,75mg纤维蛋白原,加生理盐水50ml溶解,浓度为1.5m…
使用脱硫生物素作为洗脱液,1 mM HABA或0.1M氢氧化钠再生10次左右。
可以用,但是用D-生物素洗脱后必须用高浓度氢氧化钠再生,重复使用时载量会明显变低。所以如果填料需要重复使用就必须用脱硫生物素洗脱。
我们产品属于第二代。第三代填料的洗脱液可用D-生物素,能在低浓度生物素或者变性等特殊条件下结合Strep标签蛋白,再生方法可用氢氧化钠再生且重复使用效果较好。第三代货号是20795ES 。
填料最大耐压0.3MPa。
取决于标签的暴露情况,标签暴露的就可以用。
在洗脱液中加终浓度0.1%-0.5%Triton X-100,室温混合孵育30min。
500 mM NaOAc, 50 mM CaCI2。
PNGase F的活性会被SDS抑制,所以反应溶液中必须有NP-40。 我们目前说明书NP-40建议量只是针对buffer1中的SDS的(1ul buffer1(5% SDS; 400 mM DTT)、2ul的10%NP-40) 如客户蛋白溶液中有SDS, 可以相应的多加点NP-40(参考说明书的比…
蛋白酶抑制剂PMSF及PMSF的无毒替代物,AEBSF 可能也会有影响, 请客户提取蛋白时最好不加这类抑制剂。可用20138ES,这款产品不含PMSF.
本品活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF 和 TLCK 等、金属离子螯合剂如EDTA 等的抑制。