可能原因如下:中低拷贝质粒:长片段、表达型载体常以低拷贝为主,建议加大菌体使用量,菌液过夜培养菌种问题:菌种保存中质粒丢失,养菌前先划线活化,稳定产量菌体未充分裂解:在buffer种充分重悬,避免成团试剂准备有误:有沉淀析出的溶液需要加热;加入的乙醇体积不准洗脱不充分:洗脱液预热,二次洗脱
可能原因如下:培养时间太长:培养时间建议控制在12-16h;裂解不充分:确保裂解后菌液应清亮粘稠。
内毒素残留指标不同:19038ES 提取的质粒是高纯度极低内毒素的,内毒素水平
回收率>60%,最高可达 90%。
可以。溶液还是加溶胶液,只是不用置于 50-60℃温浴了,其他步骤不变。 比例为 PCR 原液 50 uL体系,加 200 uL 溶胶液。片段小的话,也按照说明书的方式加入异丙醇。但更推荐专门的PCR产物纯化试剂盒(货号:19106ES)。
不能,需要回收PAGE胶的建议用专门的试剂盒,翌圣暂无该类产品。
如溶液颜色为橙色或紫色,建议加入10μL 3M醋酸钠(pH值5.2)溶液混合。混合物的颜色变成黄色后进行后续实验,黄色是DNA结合的最佳pH值。
1)电泳的时候,用新鲜的电泳液,不新鲜的会导致PH值升高,降低DNA和膜的吸附力;2)切胶的时候在保证目的片段的情况下,尽可能的减少胶体积,并且减少紫外灯下的暴露时间;3)观察加了溶胶液后混合物的颜色,如果是如溶液颜色为橙色或紫色,需要加入10μL3M醋酸钠(pH值5.2)溶液混合。混合物的颜色变成…
不建议,该产品主要是用于纯化PCR 反应体系以及各种反应体系(如酶切体系,连接体系等)中的DNA。
回收 DNA 长度范围:100 bp-40 kb。
洗脱体积越大,洗脱效率越高,但如果想要提高DNA片段浓度,可以适量减少洗脱体积。
不含EDTA,不影响下游酶切、连接反应;也可以选择用无酶水洗脱。
19201是浓缩形式,需要的试剂用量更少一点,提取的准确性和提取反应的速度更快一些。一般10606就可以满足常规提取需求,如果客户想好更好的提取效果和rnase抑制效果可以用19201。
可能原因如下:(1) 组织样本保存不当。RNA 提取时要选新鲜组织或细胞样本,若为冻存样本,尽量避免反复冻融。样品离开活体或原来的生长环境后,样品中的内源RNase 开始降解 RNA,降解速度与内源 RNase 的含量及温度有关;(2) 投入样本较多,导致裂解不充分。试剂不能有效抑制样品中所有的 R…
(1) 向裂解液中加入氯仿后,需要在低温下(2-8℃)高速离心。离心后,RNA 被抽提到上层的水相中,中、下层是有机相,含有氯仿,DNA 即存在于中层。氯仿在常温下会与水以一定比例互溶,因此,常温离心会导致上层水相中也有少量基因组DNA 的污染。吸取上层液体时, 应非常小心,避免吸到中间层和下层;(…
RNA 含量可能较低。建议加入异丙醇后在 4℃或-20℃放置 10-30 min 后再离心。若依然看不见沉淀,在后面弃上清的操作时,采用吸取而不是倾倒的方法,以免沉淀丢失。
一般建议2小时内提取,长期保存建议用动植物组织RNA稳定液(货号10604ES)。
mRNA和lncRNA可以的,但是miRNA可能有损失,建议用专门的miRNA提取试剂盒(19331ES/19332ES)。
细胞数量控制在10^6~10^7范围内均可。若细胞数量低于5×10^6,起始细胞量不足,会降低核酸提取效率;若细胞数量偏高,则需相应增加裂解液用量。裂解液不足会造成内源 RNA 酶裂解不充分、抑制效果不佳,进而引发 RNA 降解。同时受吸附柱负载上限限制,不可过度增加样本投入量,否则易造成杂质去除不…
可以,货号为83666ES,包含柱子和收集管。