4℃ 建议最多放置 1 周,常温建议最多 48 小时;-30 ~ -5℃ 保存有效期 24 个月。开封后请按推荐温度存放并尽早使用。
类器官需在含相应生长因子的培养基中培养;传代时以机械吹打或温和酶解分散为小团块,避免过度消化。消化后尽快重悬接种,培养过程注意防止污染与基质风干。
多 -20℃ 或 -80℃ 避光保存,运输采用干冰或冰袋;多数为无菌,是否无菌以产品说明书为准。
建议先用PBS清洗两遍,然后再加类器官消化液,4℃消化45min,消化期间摇晃几次。
B27不是单一物质,一二十个混合物,各个化合物的浓度不一样,不能直接换算。
建议先用PBS清洗两遍,然后再加类器官消化液,4℃消化45min,消化期间摇晃几次。
不可以替代,类器官的冻存需要使用专门的类器官冻存液,用于细胞的无血清冻存液对类器官不友好。
翌圣组织消化液主要组分是胶原酶,不含胰酶。
含有,该培养基中含有酚红作为pH指示剂,便于培养过程中肉眼观察培养基pH变化(正常呈橙红色,变黄提示酸化需换液)。但酚红本身具有一定的雌激素样活性,可能干扰内分泌相关或激素敏感的细胞实验,在此类实验中建议选用无酚红的配方培养基。
可以的,小肠和结肠是可以的,直肠会比较弱。
细胞因子。
如果种属是人的话,那么培养小肠和结肠的类器官都可以。
所有操作需在无菌环境下进行,所涉及到到物品应预冷后进行操作。
可将冻融后的CeturegelTM Matrix LDEV-Free基质胶分装在多个提前预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。所有涉及到使用的物品在使用前需预冷。
在一些情况下,某些细胞确实会倾向于从周围和/或中间部位迁移,因此造成在这些区域的穿膜细胞相对其他区域密集。您可以尽可能选取多个视野,并设置平行复孔,以获得能更“准确”代表细胞侵袭情况的数据。此外,如果出现区块间细胞分布过于悬殊的状况,可能有其他原因,如细胞接种不均匀,包被的Matrigel层被部分破…
如遇4℃冰上过夜解冻后基质胶未能呈现匀浆状(例如出现果冻状或半凝固状态,这是因高浓度基质胶特性所致),未呈现出较好流动性,同时枪头难以吸取,可使用预冷的DMEM培养基或预冷的PBS缓冲液进行稀释,另外可将枪头剪去前端一小段以助于吸取。
该鼠尾胶原蛋白I型不同批次蛋白浓度存在差异,但每个批次的浓度都≥3mg/mL。
包被浓度:包被实验时工作浓度需要根据具体的细胞类型进行预实验测试,通常浓度为50-100μg/mL。对于侵袭实验:建议浓度设置在1-2mg/mL之间,再根据特定的实验体系进行优化。体内皮下注射实验浓度:由于是体内实验,为了避免成胶不完全,建议终浓度在4 mg/mL以上。3D培养:建议终浓度在4 mg…
适应于2D和3D培养、侵袭和迁移实验,也可以用于体内成瘤实验。
40184是无酚红的,40183是含酚红的。